ارزیابی تأثیر پروبیوتیک های لاکتوباسیلوس کازیی و لاکتوباسیلوس پاراکازیی جدا شده از روده ماهی کپور معمولی بر بیان ژن p53 در رده سرطانی k562 به روش elisa

پروبیوتیک ها عبارتند از میکروارگانیسم هایی که با ایجاد تعادل در فلور میکروبی روده میزبان اثرات مفیدی بر سلامتی ایجاد می کنند. لاکتوباسیلوس کازیی و ل. پاراکازیی پروبیوتیک هایی هستند که می توانند آپوپتوز را در سلول های سرطانی در شرایطin vitro القاء کنند. لوسمی میلوئیدی مزمن (cml) جزء سرطان بافت های خون ساز و از شایع ترین بدخیمی های بدن محسوب می شود. امروزه از شیمی درمانی برای درمان سرطان استفاده می شود. اما چگونگی بوجود آمدن مقاومت دارویی ضروری می باشد. از دلایل اصلی مقاومت دارویی، مقاومت به القاء آپوپتوز است که به علت بیان بالای پروتئین های مهار کننده آپوپتوز رخ می دهد. p53 یک ژن سرکوب کننده تومور می باشد که در بیش از 50 درصد تومورهای انسانی دچار جهش شده است. بیان پروتئین های جهش یافته p53 در رده های سرطانی، مقاومت در مقابل آپوپتوز را افزایش می دهند. بر این اساس هدف از بررسی حاضر تاثیر دیواره سلولی ل. کازیی و ل. پاراکازیی بر مرگ سلولی در رده سرطانی k562 و ارزیابی تاثیر عصاره سیتوپلاسمی و دیواره سلولی این پروبیوتیک ها بر بیان ژن p53 در شرایط آزمایشگاهی بود. برای این منظور ابتدا باکتری ها کشت داده شد، سپس به کمک دستگاه سونیکاتور خرد و در نهایت دیواره سلولی و عصاره سیتوپلاسمی آنها جدا شدند. در مرحله بعد غلظت های مختلفی از دیواره سلولی تهیه و خواص ضد توموری آنها علیه رده سرطانی k562 در شرایط آزمایشگاهی با روش mtt سنجیده شد. همچنین برای بررسی آپوپتوز از آزمون قطعه قطعه شدن dna به روش الکتروفورز استفاده شد. در نهایت برای بررسی بیان ژن p53 در سلول های تیمار شده با عصاره سیتوپلاسمی و دیواره سلولی، میزان پروتئین p53 به روش الایزا سنجیده شد. نتایج نشان داد که دیواره سلولی به طور معنی داری (05/0p<) باعث القاء مرگ سلول های سرطانی می شود. همچنین مشخص شد تغییر تعداد سلول های سرطانی تاثیری بر نتایج حاصل از تست mtt ندارد. نتایج به دست آمده از الکتروفورز نشان داد که دیواره سلولی باعث القاء آپوپتوز در سلول های k562 می شود. همچنین یافته های حاصل از آزمون الایزا نشان دادند، عصاره سیتوپلاسمی و دیواره سلولی باعث کاهش معنی دار (05/0>p) سطح پروتئین حاصل از ژن جهش یافته p53 نسبت به گروه شاهد می شوند. بنابراین می توان نتیجه گرفت بین کاهش بیان ژن p53 و القاء آپوپتوز در سلول ها با ژن p53 جهش یافته رابطه وجود دارد که این می تواند راهی برای درمان هدفمند سرطان ارائه کند.